浓缩与初步除杂
· 合并提取液,减压浓缩至无醇味,得浸膏。
· 除多糖/蛋白质:
· 加入3-4倍体积95%乙醇沉淀多糖,静置后离心取上清。
· 或用Sevage法(氯仿:正丁醇=4:1)去除蛋白质。
---
3. 黄酮的纯化
液液萃取法
· 用乙酸乙酯或正丁醇萃取水相中的黄酮(黄酮苷元更易溶于乙酸乙酯,苷类偏向正丁醇)。
· 重复3-4次,合并有机相,减压浓缩。
柱层析法(关键步骤)
· 吸附剂选择:
· 聚酰胺柱:适合黄酮(氢键吸附),用30%-95%乙醇梯度洗脱(如先水洗去糖,再用50%乙醇洗黄酮)。
· 硅胶柱:对黄酮苷元效果好,洗脱剂用氯仿-甲醇梯度(如10:1→5:1)。
· 大孔树脂(如AB-8、D101):先水洗去糖,再用30-70%乙醇洗脱黄酮。
· 操作要点:
· 上样量不超过柱体积的1/10,流速1-2 BV/h。
· 分段收集,通过TLC(硅胶G板,展开剂:乙酸乙酯-甲酸-水=8:1:1)或HPLC监测目标成分。
重结晶
· 对纯度
第291章 《哀丽秘榭的白默》(重制)-->>(第2/3页),请点击下一页继续阅读。