较高的部分,可用甲醇-水或乙醇-乙酸乙酯混合溶剂重结晶。
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4. 鉴定与验证
· 显色反应:
· 盐酸-镁粉反应(橙红色)、AlCl3反应(黄色荧光)初步确认黄酮。
· HPLC/MS:
· 对照品比对(如芦丁、槲皮素等),或通过质谱分析分子量及结构。
· UV光谱:黄酮类在250-280nm(Band II)、330-380nm(Band I)有特征吸收。
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注意事项
1. 避免氧化:提取过程避光、氮气保护,尤其对含酚羟基的黄酮。
2. 梯度优化:柱层析时需预试验确定最佳洗脱比例。
3. 得率与纯度平衡:高纯度可能损失得率,需根据需求调整(如药用需≥95%)。
4. 中试放大:若工业化生产,需优化溶剂回收、树脂再生等成本问题。
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示例流程(简化版)
黄精粉→70%乙醇回流→浓缩→AB-8树脂(水洗→50%乙醇洗)→浓缩洗脱液→聚酰胺柱(水→30%乙醇)→冷冻干燥→黄酮组分(纯度可达80%以上)。
通过上述方法可高效分离黄精黄酮,后续可结合制备型HPLC或结晶进一步提高纯度。