第164章 实验正式开始

    江河今日，提前下班。

    医院这边的子弹，且让它先飞一会儿。

    回学校推进科研项目去。

    重症急性胰腺炎的论文已经发出，接下来的重头戏，是miRNA早筛。

    这玩意做出来，是真正能撼动全世界的核武器，更是他前世今生执念的所在：

    ——攻克胰腺癌，从极早期的精准筛查开始。

    返回南医大的公交车，江河在项目组的QQ群里发了一条消息。

    「所有人，一小时後，实验室开会。」

    实验室。

    江河进去的时候，众人都乖巧坐着。

    「老大。」易向晚道，「你不是上班麽？怎麽这会儿就回来了？没有迎新聚餐什麽的？」

    「聚餐没有，倒是给我排了十五张重症床位。」

    「啊，十五张？附一院现在把新人当牲口使啊？」

    「没事，不用管医院那边，今天喊你们过来，是因为我们前期收集的几百份冻存血清样本已经全部到位了，miRNA早筛项目，从今天开始，正式进入湿实验阶段。」

    此话一出，几个人的神色瞬间变得严肃。

    跟江河混了这麽久，他们很清楚这个项目的分量。

    江河从包里拿出一沓列印好的A4纸，分发给众人。

    「这是我这两天做出来的实验方案，大家先看一看。」

    众人接过方案，低头翻阅。

    江河：「这个项目的前景有多大，我以前跟你们说过，但我今天必须给你们打个预防针，这个过程，会极其枯燥，且充满挫折。」

    「简单来说，我们要在血液里，找到与肿瘤相关的miRNA，目前，针对血清miRNA的商业化提取试剂盒还不够成熟，我们只能用最基础的方法来做。」

    江河站起身，走到白板前，拿起马克笔画了一个简单的流程图。

    「第一步，RNA提取，这是最耗时的一步，也是你们未来几个月每天都要重复的工作。」

    「我们手头有近六百份血清样本，我要求你们使用Trizol LS试剂法来进行提取，因为血清中本身存在大量的RNase（核糖核酸酶），如果不迅速裂解，我们的目标RNA就会降解得一乾二净。」

    「记住几个核心要点。」

    「第一，绝对的无酶环境，我们的枪头、EP管必须是去RNA酶处理过的，台面每天实验前用RNaseZap喷洒後，再用DEPC水擦拭。」

    「第二，加氯仿後的相分离，离心完，吸取上层水相的时候，手千万不要抖，哪怕少吸一点水相，也绝不能吸到中间的白色蛋白层，一旦污染，後面的数据全废。」

    唐培认真地在方案上做着笔记：「老大，提取完之後呢？」

    「提取完之後，是逆转录（RT）和实时萤光定量PCR（qPCR）。」

    江河写下了一个数学公式。

    「这是相对定量的计算公式，但因为miRNA太短了，只有大约22个核苷酸，传统的随机引物根本无法对其进行逆转录，所以，我们需要在逆转录之前，进行Poly(A)加尾，或者使用特异性的茎环（Stem-loop）引物。」

    「现阶段，我们用最基础的加尾法，这些长周期、重复性的基础提取和建库工作，我今天全部分配下去，两人一组，轮班倒，一个月内，我要看到这六百份样本的A文库全部建立完毕，听明白了吗？」

    顾亦舟严肃点头：「没问题老大，交给我们。」

    江河看着手里的实验方案，突然想到副院长张随。

    张随是美国约翰·霍普金斯大学医学院的博士後。

    在08年，全球范围内在miRNA循环标志物领域走得最前沿的，除了哈佛的几家附属医院，就是约翰·霍普金斯的肿瘤学团队。

    他们是江河这个项目在国际上最大的竞争对手。

    想要在国际顶刊上

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